校正染料(ROX)的应用能够有效校正加样误差及孔间差异，为实验提供一个稳定的基线，从而显著提高定量结果的精准度和重复性。需要注意的是，不同仪器对ROX的使用需求各异。在基线PCR的最初若干个循环中，荧光信号几乎无变化，阈值可视为可信的最小荧光值。CT值是扩增曲线与阈值交点的横坐标。

结果有效性判断

在实验中，融解曲线应呈单峰（染料法），扩增曲线应显示指数增殖区域。同时，复孔间CT值标准差应<0.2，以确保阈值的合理性。合理的阈值应位于指数增长期。尽管仪器会自动计算阈值，但并非在所有情况下得出的结果都符合实际需求，因此可能需要手动调整。

对于无气溶胶污染的确认，使用NTC（无模板对照）可替代水进行qPCR反应；若ΔCT=NTC(CT值) - 目的基因(CT值)≥3或≥5，表示气溶胶污染未影响结果的准确性。另外，通过NRT（无逆转录对照）可确认无基因组残留，若ΔCT=NRT(CT值) - 目的基因(CT值)≥3或≥5，则基因组残留对实验结果的影响可以忽略。

被测CT值应位于线性范围内，且扩增效率应符合标准，PCR扩增效率(e)需在90%-120%之间。

公司简介

PG电子(广州)科技技术有限公司专注于生物医药领域，致力于为客户提供高品质的产品和技术服务，逐步发展成为基因治疗及细胞治疗领域的领军生物科技企业。我们的总部设在广州，服务覆盖全国，能够在第一时间内为用户提供前沿的专业资讯和完整的产品及物流服务。凭借强大的技术实力，我们为广大用户提供持续的技术支持，并依托广泛的人脉资源，在全国重要城市建立了众多合作伙伴关系。PG电子非常荣幸能将全球最先进的高科技产品推荐给国内生物学领域的研究人员和同仁。作为专业产品供应商，公司备有大量现货，并配备优秀的销售团队与专业技术支持，随时为客户提供高效服务。